Eluenten

Als Elution bezeichnet man das Ab- oder Herauslösen von Substanzen aus einer stationären Phase. In der Chromatographie kann die stationäre Phase sowohl aus festem, als auch aus flüssigem Material bestehen. Bei diesem Vorgang wird eine mobile Phase, die sich aus einem oder auch mehreren Lösungsmitteln zusammensetzt, an der stationären Phase vorbeigeführt. Diese mobile Phase bezeichnet man als Eluent beziehungsweise Fließmittel. Um bestmögliche Ergebnisse mit diversen Arten von Säulen zu erzielen, steht eine Vielzahl an verschiedenen Eluenten in unterschiedlichen Reinheitsgraden zur Verfügung. 

Als Elution bezeichnet man das Ab- oder Herauslösen von Substanzen aus einer stationären Phase. In der Chromatographie kann die stationäre Phase sowohl aus festem, als auch aus flüssigem Material bestehen. Bei diesem Vorgang wird eine mobile Phase, die sich aus einem oder auch mehreren Lösungsmitteln zusammensetzt, an der stationären Phase vorbeigeführt. Diese mobile Phase bezeichnet man als Eluent beziehungsweise Fließmittel. Um bestmögliche Ergebnisse mit diversen Arten von Säulen zu erzielen, steht eine Vielzahl an verschiedenen Eluenten in unterschiedlichen Reinheitsgraden zur Verfügung. 

Der Detektor, insbesondere UV-Detektoren, grenzt die Auswahl des Eluenten ein, denn ein passender Eluent muss zur spezifischen Methode und Ausrüstung passen. Für UV-Detektoren beispielsweise ist es wichtig, dass der Eluent keine Eigenabsorption im relevanten Wellenlängenbereich zeigt. Darüber hinaus muss er kompatibel mit der stationären Phase der Trennsäule sein – sei es für RP- oder NP-HPLC. Die Eignung des Eluenten für isokratische oder Gradientenelutionen ist ebenfalls entscheidend für den Erfolg der Methode.

Ein idealer Eluent passt sich dem Lösungsmittel der Substanz an, um die Chromatographie unbeeinflusst zu lassen. Ist dies nicht möglich, empfiehlt es sich, einen Eluenten zu wählen, der entweder strukturelle Ähnlichkeit mit dem Lösungsmittel aufweist oder sich problemlos mit diesem mischen lässt, um Störungen wie Doppelpeaks oder unregelmäßige Peakformen zu vermeiden.

Die Reinheit eines Eluenten ist essenziell, da selbst geringfügige Verunreinigungen die Ergebnisse der chromatographischen Analyse beeinträchtigen können. Insbesondere in der HPLC sind höchste Reinheitsstandards erforderlich, um präzise und reproduzierbare Ergebnisse zu erzielen. Produkte mit HPLC- oder LC-MS-Grade garantieren die Abwesenheit von unerwünschten Verbindungen. Zertifikate und Qualitätsstandards geben zusätzliche Sicherheit und Vertrauen in die Verlässlichkeit des Eluenten.

Bei Gradiententrennungen stellt die Viskosität der Eluentengemische ein häufiges Problem dar, da eine zu hohe Viskosität zu Druckanstiegen im System führen kann, die entweder erhöhten Materialverschleiß oder sogar den Abbruch der Messung zur Folge haben. Methanol/Wasser-Mischungen sind hierbei besonders kritisch, da sie bei einem Wasseranteil von 40-60% nicht nur eine höhere Viskosität als Acetonitril/Wasser-Mischungen aufweisen, sondern auch zur verstärkten Bildung von Luftblasen neigen. Die Entfernung der Luftblasen ist mit einfachen Methoden, beispielsweise Ultraschallbädern, meist unzureichend, sodass ergänzende Schritte wie der Einsatz von Back-Pressure-Regulatoren oder HPLC-Kapilaren notwendig werden, um eine stabile Messung zu ermöglichen.

Die praktische Handhabung spielt auch eine wichtige Rolle bei der Auswahl eines Eluenten. Er sollte stabil sein, keine Peroxide bilden und sich auch bei längerer Lagerung nicht verfärben. Eine geringe Blasenbildung ist besonders wichtig, um störende Quenchingeffekte zu vermeiden. Bei toxischen Substanzen wie Acetonitril ist zudem auf Sicherheitsaspekte zu achten, um gesundheitliche Risiken zu minimieren.

Acetonitril bietet in den meisten Fällen mehr Vorteile, da es zu schnelleren und problemfreieren Trennungen führen kann. Die endgültige Wahl hängt jedoch von der Beschaffenheit der Substanzen, der Wellenlänge des Detektors und finanziellen sowie toxischen Überlegungen ab.

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