Eluenten - HPLC-Lösungsmittel

Eluenten bei der Chromatographie

Als Elution bezeichnet man das Ab- oder Herauslösen von Substanzen aus einer stationären Phase. In der Chromatographie kann die stationäre Phase sowohl aus festem, als auch aus flüssigem Material bestehen. Bei diesem Vorgang wird eine mobile Phase, die sich aus einem oder auch mehreren Lösungsmitteln zusammensetzt, an der stationären Phase vorbeigeführt. Diese mobile Phase bezeichnet man als Eluent beziehungsweise Fließmittel. Um bestmögliche Ergebnisse mit diversen Arten von Säulen zu erzielen, steht eine Vielzahl an verschiedenen Eluenten in unterschiedlichen Reinheitsgraden zur Verfügung.

Die Auswahl des richtigen Eluents

Für die richtige Anwendung einer chromatographischen Methode ist die Auswahl des passenden Eluenten von elementarer Bedeutung. Welches Eluent gewählt wird, ist unter anderem abhängig von der verwendeten HPLC-Säule und dem eingesetzten Detektor. Beispielsweise benötigen UV-Detektoren, um die Detektion der Substanzen nicht negativ zu beeinflussen, Fließmittel, die bei der verwendeten Wellenlänge keine Restabsorption zeigen. Um eine Beeinflussung der Chromatographie auszuschließen, sollte im besten Fall das Lösungsmittel der jeweiligen Substanz als Eluent eingesetzt werden – ist dies nicht möglich, sollten Fließmittel und Lösungsmittel zumindest eine ähnliche Struktur besitzen oder gut mischbar sein. Methanol lässt sich zum Beispiel als Eluent bei UV-Detektoren, deren Messbereich oberhalb von 230 nm liegt, einsetzen. Es weist im Vergleich zu Acetonitril eine geringe Toxizität auf und ist preisgünstig. Acetonitril dagegen ist für den Einsatz bei UV-Detektoren, die in Bereichen von 200 nm (oder weniger) messen geeignet und weist in der Mischung mit Wasser eine geringere Viskosität als Methanol auf. Dies ist insofern von Bedeutung, als dass eine zu hohe Viskosität den Druck erhöht und zum Abbruch der Messung führen kann. Acetonitril verfügt zudem über eine vergleichsweise hohe Elutionskraft.

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